-- 作者：admin
-- 发布时间：9/23/2004 2:05:00 AM
-- 蛋白质芯片
蛋白质芯片
发信人: happymood (土豆块儿), 信区: Bioinformatics
标 题: 蛋白质芯片
发信站: 北大未名站 (2001年04月09日22:52:49 星期一), 站内信件 发信人: molecule (我是风), 信区: LifeScience
标 题: 蛋白质芯片(转信)
发信站: BBS 水木清华站 (Sat Dec 16 14:18:47 2000) WWW-POST 现在DNA芯片的研究正值热火朝天之时。利用此高通量手段，研究者可以一次研究众
多的mRNA在某种特定情况下的水平变化。但是这方法始终不能与编码的蛋白质联系起来.
Science 9月8日Gavin MacBeath and Stuart Schreiber首先报道了利用蛋白质微型方阵
研究蛋白质相互作用及与小分子作用的研究。
蛋白质方阵要解决的问题不外有三，一保持蛋白的活性，二保证蛋白质正确定位，
三
与现存的mRNA微型方阵研究工具要相兼容。他们是如何解决以上问题的呢？
首先在点样的nanaliter级溶液中加入40 ジ视停 止蛋白变性。在膜表面覆盖一层
与氨基反应的试剂。这样，蛋白质的氨基末端或 彼岵谢突嵊氪耸约练从 而固定于
膜
上。每一中蛋白质都会以多种不同的方向进行定位，保证有正确的定位。然后用BSA进行
封闭，降低膜上的背景，这样就可以与蛋白质进行杂交了。
Gavin MacBeath and Stuart Schreiber利用这些简单的手段制成了每平方厘米有
1600个点的蛋白质微型方阵。
研究者用荧光基因标记蛋白，ATP标记的激酶底物，都可与膜上的蛋白进行反应。这
些都是用小部分的膜进行实验的。最终他们将一个有1万个点的芯片与一个FRB(FKBP12
–rapamycin binding protein)结合蛋白和G-protein 结合蛋白的探针进行杂交。发现
在
一大片G-protein点的中央，单独的一个FRB的点被区分了出来。
接下来，我们就要等待蛋白质芯片进一步开发，商业化，进入我们的实验室了(可能
要N年以后了)。
相关文章：ORIGINAL RESEARCH PAPER MacBeath, G. & Schreiber, S. L. Printing
proteins as microarrays for high-throughput function determination.
Science 289, 1760–1763 (2000) PubMed -- --
※ 来源:·北大未名站 bbs.pku.edu.cn·[FROM: 166.111.185.231]
|